一、基礎(chǔ)信息
1. 產(chǎn)品貨號與名稱
- 貨號:TR-100-FJT、TR-100-FJ
- 英文名稱:Fluoro-Jade C (FJC) Ready-to-Dilute Staining Kit for identifying Degenerating Neurons
- 中文名稱:Fluoro-Jade C (FJC) 退化神經(jīng)元染色試劑盒
2. 規(guī)格與品牌
- 規(guī)格:20 mL、40mL
- 品牌:Biosensis
二、核心原理
1. Fluoro-Jade C 的化學(xué)特性
Fluoro-Jade C(FJC)是一種陰離子熒光素衍生物,通過特殊化學(xué)修飾增強了與變性神經(jīng)元的親和力。其分子結(jié)構(gòu)包含多個羧基基團(tuán),使其在生理條件下帶負(fù)電荷,能夠特異性結(jié)合變性神經(jīng)元膜表面暴露的酸性磷脂和變性蛋白質(zhì)(如磷酸化神經(jīng)絲)。
2. 染色機制
- 變性神經(jīng)元識別:當(dāng)神經(jīng)元發(fā)生退行性變時,細(xì)胞膜通透性增加,酸性成分暴露。FJC通過靜電相互作用和疏水效應(yīng)結(jié)合這些成分,形成穩(wěn)定的熒光標(biāo)記。
- 高分辨率成像:FJC的激發(fā)峰為495 nm,發(fā)射峰為521 nm,與FITC濾光片兼容,可清晰顯示退化神經(jīng)元的胞體、樹突、軸突及末端形態(tài),分辨率顯著優(yōu)于傳統(tǒng)銀染和早期Fluoro-Jade染料(如FJ、FJB)。
- 抗褪色性能:FJC分子結(jié)構(gòu)中的剛性平面設(shè)計使其具有優(yōu)異的抗光漂白能力,染色結(jié)果可長期保存(4℃避光保存數(shù)周),適合高分辨率共聚焦顯微鏡成像。
三、解決實驗中的關(guān)鍵問題
1. 傳統(tǒng)方法的局限性
- 銀染技術(shù):操作繁瑣、耗時(需2-3天),且無法與免疫熒光標(biāo)記兼容,難以實現(xiàn)多重染色。
- TUNEL法:僅檢測DNA斷裂,無法顯示神經(jīng)元整體形態(tài),且對早期變性神經(jīng)元不敏感。
- 硫黃素S等染料:特異性差,易與淀粉樣斑塊非特異性結(jié)合,背景干擾嚴(yán)重。
2. FJC染色的突破性解決方案
- 全階段變性神經(jīng)元檢測:可同時標(biāo)記凋亡、壞死和自噬性死亡的神經(jīng)元,覆蓋從早期胞體腫脹到晚期軸突斷裂的完整退變過程。
- 形態(tài)學(xué)與功能學(xué)結(jié)合:在顯示神經(jīng)元退變的同時,可與NeuN、TH等抗體進(jìn)行多重染色,明確退變神經(jīng)元的類型和功能狀態(tài)。
- 多組織兼容性:適用于新鮮冷凍、多聚甲醛/福爾馬林固定及石蠟包埋組織,無需復(fù)雜預(yù)處理即可獲得高質(zhì)量染色結(jié)果。
四、技術(shù)優(yōu)勢
1. 即用型設(shè)計,簡化實驗流程
- 試劑盒包含F(xiàn)JC染色液、DAPI復(fù)染液、氫氧化鈉和KMnO?,無需自行配制,直接使用。
- 標(biāo)準(zhǔn)化操作步驟:組織切片經(jīng)固定、通透化后,只需依次浸入KMnO?(消除背景)、FJC染色液(30分鐘)和DAPI(5分鐘),全程可在2小時內(nèi)完成。
2. 高靈敏度與特異性
- 信噪比優(yōu)勢:FJC的信號背景比顯著高于FJB和硫黃素S,在低倍鏡下即可清晰觀察退變神經(jīng)元的分布,尤其適合大樣本定量分析。
- 非特異性染色控制:通過KMnO?預(yù)處理消除組織內(nèi)自發(fā)熒光,結(jié)合DAPI復(fù)染細(xì)胞核,可有效區(qū)分神經(jīng)元與血管、膠質(zhì)細(xì)胞等非特異性染色。
3. 兼容性與靈活性
- 多重?zé)晒鈽?biāo)記:FJC的激發(fā)/發(fā)射光譜與Alexa Fluor 488、Cy3等常用熒光素?zé)o重疊,可與β-淀粉樣蛋白(Aβ)、磷酸化tau蛋白等抗體聯(lián)合使用,實現(xiàn)退變神經(jīng)元與病理標(biāo)志物的共定位分析。
- 跨物種應(yīng)用:已在小鼠、大鼠、猴及人類腦組織中驗證,適用于多種神經(jīng)退行性疾病模型(如5×FAD轉(zhuǎn)基因小鼠、MPTP誘導(dǎo)的PD模型)。
4. 抗干擾與穩(wěn)定性
- 抗組織處理干擾:對福爾馬林固定、石蠟包埋等劇烈處理具有耐受性,染色結(jié)果重復(fù)性高。
- 長期保存性能:未開封試劑盒可在4℃穩(wěn)定保存12個月,稀釋后的染色液需在4小時內(nèi)使用以確保最佳效果。
五、應(yīng)用場景與客戶群體
1. 核心應(yīng)用領(lǐng)域
- 神經(jīng)退行性疾病研究:
- 阿爾茨海默病(AD):檢測Aβ斑塊周圍的退變神經(jīng)元,研究突觸丟失與認(rèn)知功能的關(guān)系。
- 帕金森病(PD):在MPTP誘導(dǎo)的小鼠模型中,定位黑質(zhì)致密部(SNc)多巴胺能神經(jīng)元的退變過程。
- 肌側(cè)索硬化(ALS):分析脊髓運動神經(jīng)元的軸突退變與膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)。
- 神經(jīng)損傷與修復(fù)研究:
- 腦缺血模型:檢測缺血半暗帶神經(jīng)元的退變動態(tài),評估溶栓治療效果。
- 脊髓損傷模型:追蹤軸突再生過程中退變軸突的清除效率。
- 藥物研發(fā)與毒性評估:
- 神經(jīng)保護(hù)藥物篩選:在細(xì)胞或動物模型中驗證候選藥物對退變神經(jīng)元的保護(hù)作用。
- 神經(jīng)毒性評價:評估藥物、重金屬等對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷機制。
2. 目標(biāo)客戶群體
- 科研機構(gòu)與高校:神經(jīng)科學(xué)、病理學(xué)、藥理學(xué)實驗室,用于基礎(chǔ)機制研究和論文發(fā)表。
- 生物醫(yī)藥企業(yè):藥物研發(fā)部門,用于神經(jīng)退行性疾病藥物的臨床前模型驗證。
- CRO公司:提供外包染色服務(wù),支持藥物毒理學(xué)評價和病理分析。
六、訂貨信息
1. 中國代理商:上海起發(fā)
2. 注意事項
- 價格咨詢:產(chǎn)品價格需通過代理商獲取,根據(jù)訂購量可享批量折扣。
- 運輸與保存:試劑盒需4℃避光保存,運輸過程中使用冰袋確保穩(wěn)定性。
- 實驗建議:
- 組織切片需充分固定(多聚甲醛或福爾馬林),避免非特異性染色。
- 染色后切片應(yīng)避免長時間暴露于強光下,建議使用抗褪色封片劑(如含DAPI的SlowFade Gold)。
- 新鮮稀釋的FJC染色液好用,剩余溶液可冷藏避光保存48小時,但需在使用前過濾以去除沉淀。
七、技術(shù)驗證與典型案例
1. 實驗流程驗證
- 組織處理:取MPTP誘導(dǎo)的PD小鼠中腦切片,經(jīng)4%多聚甲醛固定后,依次用KMnO?(0.01%)處理5分鐘、FJC染色液孵育30分鐘、DAPI復(fù)染5分鐘,封片后在熒光顯微鏡下觀察。
- 結(jié)果顯示:黑質(zhì)致密部(SNc)可見大量FJC陽性神經(jīng)元,胞體皺縮、樹突斷裂,與TH免疫熒光染色結(jié)果共定位,證實退變神經(jīng)元為多巴胺能神經(jīng)元。
2. 多重染色應(yīng)用
- 實驗設(shè)計:在5×FAD轉(zhuǎn)基因小鼠腦切片中,同時進(jìn)行FJC染色和Aβ免疫熒光標(biāo)記(Alexa Fluor 594偶聯(lián)抗體)。
- 結(jié)果顯示:FJC陽性神經(jīng)元環(huán)繞Aβ斑塊分布,提示斑塊周圍神經(jīng)元退變與Aβ沉積密切相關(guān)。
關(guān)鍵詞:Biosensis Pty Ltd, Biosensis 神經(jīng)科學(xué)抗體, Biosensis ELISA試劑盒, Fluoro-Jade C 退化神經(jīng)元染色試劑盒, 神經(jīng)元乙酰受體亞基α-4抗體, 食欲素A抗體, 自噬相關(guān)蛋白ATG3抗體, 淀粉樣斑塊染色試劑盒, 神經(jīng)肽RFRP-3抗體, BDNF Rapid ELISA試劑盒, NGF ELISA試劑盒, 神經(jīng)退行性疾病研究抗體, 神經(jīng)元細(xì)胞可視化試劑, 神經(jīng)肽食欲素受體2型抗體, 神經(jīng)激肽-3受體抗體, 神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白-4抗體, 前動力蛋白-2抗體, 痛敏肽抗體, 神經(jīng)肽速激肽-3抗體, 神經(jīng)肽受體亞基α-1抗體, 腦特異性血管生成抑制劑2抗體, 神經(jīng)肽P物質(zhì)抗體, 神經(jīng)肽神經(jīng)肽A抗體, 神經(jīng)肽神經(jīng)肽B抗體, 神經(jīng)肽神經(jīng)肽K抗體, 神經(jīng)肽Y抗體, 神經(jīng)肽痛敏肽抗體, 神經(jīng)肽食欲素抗體,F(xiàn)luoro-Jade C (FJC) 退化神經(jīng)元染色試劑盒
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